l 說(shuō)明:
PVDF膜通常都需要酒精預濕(Prewet)、洗滌。這些操作一方面需在無(wú)菌條件下完成,過(guò)程繁雜;另一方面,洗滌如果不徹底,膜上殘留的乙醇對抗體的包被乃至后續細胞因子檢測等均有不同程度的影響。為了幫助廣大的ELISPOT實(shí)驗操作人員減輕工作強度、節省寶貴的時(shí)間,同時(shí)也為了減少污染的機會(huì ),達科為公司經(jīng)過(guò)不懈地努力與反復地驗證,終于研發(fā)出了有自主知識產(chǎn)權的PVDF膜ELISPOT包被抗體緩沖液Magi? Coating Buffer(貨號DKW01-0030),能夠免除酒精預濕和洗滌的步驟,同時(shí)有效保護包被抗體。
l 使用方法:
Magi? Coating Buffer的使用方法極簡(jiǎn)單:先取15μl Magi? Coating Buffer潤濕PVDF孔,待孔完全潤濕之后(只要Magi? Coating Buffer接觸到了孔底,會(huì )在2-3秒之內完全潤濕整個(gè)孔,膜的顏色變得透亮)然后加入50μl 經(jīng)PBS稀釋過(guò)的包被抗體,4?C包被過(guò)夜。見(jiàn)前面的“方案A Magi? Coating Buffer潤濕包被程序”,這種方法省去了預濕之后的洗滌步驟,也能得到和傳統酒精預濕一樣的效果。
l 注意事項:
2 抗體凍干粉仍然用去離子水溶解。千萬(wàn)不要用Magi? Coating Buffer來(lái)溶解凍干粉!
2 包被抗體應該在使用前才稀釋?zhuān)S用隨稀釋。因為抗體稀釋之后,濃度變低,穩定性下降。
2 4?C包被過(guò)夜(12-24小時(shí),通常18小時(shí))是經(jīng)過(guò)優(yōu)化的包被條件,我們不推薦室溫或者37?C的快速包被。
Magi? Coating Buffer 4?C可以保存一年,注意保持無(wú)菌。