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嘿！PTM ! 我抓住你啦！
*偷偷告訴你：文末有驚喜?。?！
PTM全稱(chēng)Post-translationalmodification，即翻譯后修飾，是蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程的較后步驟。PTM之于蛋白質(zhì)，有點(diǎn)像PS之于照片，經(jīng)過(guò)PTM的蛋白質(zhì)會(huì )有不同的樣子和功能。
今天給大家介紹一款很厲害的試劑盒，能夠準確高效的提取并富集不同的PTM，方便您的后續研究~
蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承擔者，蛋白質(zhì)層面的研究，最常被關(guān)注的就是蛋白表達量的改變。然而，蛋白表達量高低的調控形式過(guò)于單一，難以滿(mǎn)足生物體如此復雜的運行要求。
那么如何解決這個(gè)問(wèn)題呢？別急，大自然早就為蛋白質(zhì)加好了buff~ 這個(gè)buff就是PTM, 蛋白質(zhì)的翻譯后修飾。
蛋白質(zhì)的翻譯后修飾(Proteinpost-translational modification, PTM)是一項重要的技能，是指在蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈上共價(jià)結合化學(xué)小分子基團，例如我們最了解的磷酸化修飾：
據估計，哺乳動(dòng)物含有數百萬(wàn)種獨特的蛋白質(zhì)組但其卻源于一個(gè)相對簡(jiǎn)單的基因組（約25000個(gè)基因），蛋白質(zhì)組的復雜程度和蛋白質(zhì)功能的多樣性都要歸功于PTM。
目前已知的PTM的種類(lèi)超過(guò)400種，幾乎所有的蛋白質(zhì)均可發(fā)生PTM。并且，同一個(gè)蛋白質(zhì)還可同時(shí)具有多種PTM。蛋白發(fā)生PTM后，會(huì )顯著(zhù)改變其理化性質(zhì)和構象，從而直接改變蛋白的結合能力與功能。因此,即使蛋白本身的表達水平?jīng)]有改變，但如果翻譯后修飾的狀態(tài)發(fā)生改變，蛋白的功能也會(huì )顯著(zhù)變化。
在PTM這個(gè)超級buff的加持下，蛋白質(zhì)的種類(lèi)和功能都得到了指數級擴增。
下圖以中間絲蛋白（IF）為例,描述了針對于IF的各種不同PTM對于其蛋白功能的影響：
盡管目前已知的PTM的種類(lèi)超過(guò)400種，但只有少數幾個(gè)被詳細研究過(guò)，主要包括甲基化、磷酸化、乙?；?、泛素化和SUMO化，它們被證明是幾乎所有細胞的關(guān)鍵調節因素，包括信號轉導、表觀(guān)遺傳學(xué)、基因和蛋白質(zhì)表達、蛋白質(zhì)穩定性和定位以及細胞免疫。
目前主要研究的PTM及其作用和特點(diǎn)
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PTM類(lèi)別 |
已發(fā)表作用 |
新發(fā)現作用 |
目標氨基酸 |
修飾物 |
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甲基化 |
表觀(guān)調節 |
蛋白質(zhì)互作，信號轉導 |
R, K |
甲基轉移酶, 去甲基化酶 |
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磷酸化 |
信號轉導 |
蛋白質(zhì)互作，表觀(guān)調節 |
Y, S, T |
激酶，磷酸酶 |
|
乙?；?/span> |
表觀(guān)和代謝調節 |
蛋白質(zhì)穩定性、定位、合成 |
K |
乙?；?， 去乙?；?/span> |
|
泛素化 |
蛋白酶體靶向-降解 |
蛋白質(zhì)定位，蛋白質(zhì)互作 |
K |
泛素連接酶, 去泛素化酶 |
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SUMO化 |
核蛋白定位，轉錄活性 |
蛋白質(zhì)穩定性、應激反應、細胞周期 |
K |
SAE, ubc9, SENP |
蛋白修飾及功能的多樣性是維持機體復雜精準調控的基礎，但同時(shí)也給研究PTM的科研人員的研究造成了很多的困擾。
為什么蛋白質(zhì)翻譯后修飾的鑒定難度要遠遠高于未發(fā)生修飾的蛋白質(zhì)的鑒定，主要有以下幾點(diǎn)原因：
-
發(fā)生翻譯后修飾的蛋白質(zhì)樣本量相對較少；
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發(fā)生修飾時(shí)形成的共價(jià)鍵非常不穩定，且處于動(dòng)態(tài)變化中 ；
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修飾與未修飾的蛋白及多種修飾形式的蛋白常混合存在 。
針對這些困擾，Cytoskeleton公司開(kāi)發(fā)了一系列名為 Signal-Seeker? 的試劑盒，用于研究各種蛋白翻譯后修飾。
Signal-Seeker? 試劑盒使用親和磁珠從任何給定的細胞或組織裂解液中提取并富集修飾蛋白，然后通過(guò)標準的Western blot程序分析濃縮蛋白群，最終用戶(hù)使用自身的抗體檢測所需的修飾蛋白。
Signal-Seeker?試劑盒檢測流程如下圖
Signal-Seeker?試劑盒的特點(diǎn)和優(yōu)勢
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Signal-Seeker?試劑盒配套相應的抗體，能對任意蛋白的轉錄后修飾進(jìn)行研究；
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Signal-Seeker?試劑盒提供通用的裂解過(guò)濾系統及定量工具，能輕松從給定的細胞或組織裂解液中提取蛋白并進(jìn)行總蛋白的定量；
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Signal-Seeker?親和磁珠，富集效果無(wú)與倫比，配合對照磁珠，提供PTM蛋白精準定量；
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Signal-Seeker?親和磁珠可用于捕獲PTM修飾的蛋白，然后用于進(jìn)行進(jìn)一步的分析（如Westernblot和質(zhì)譜檢測）；
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關(guān)鍵的去修飾化抑制劑，防止檢測過(guò)程中的去修飾；
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Signal-Seeker?kit可以用于研究多重PTM的串擾（例如目標蛋白的泛素化和乙?；?；
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市面上最全面的PTM試劑盒：包括通用裂解過(guò)濾系統、蛋白質(zhì)定量工具、IP濃縮試劑、洗滌試劑、洗脫試劑、化學(xué)發(fā)光試劑。
Signal-Seeker?試劑盒應用實(shí)例
Signal-Seeker?試劑盒研究Rac1蛋白的單泛素化和多元泛素化
用MG-132預處理Swiss 3T3 細胞，然后添加/不添加CNF1 (cat# CN04)處理3h，用BK161 kit來(lái)進(jìn)行 IP，裂解液上樣量300 μg /次。
Lane 1: 3 μg 未處理的裂解液；
Lane 2: Ubiquitin親和磁珠(cat# UBA01) +未處理的裂解液；
Lane 3: UBA01 + CN04處理的裂解液；
Lane 4: Ubiquitin 對照磁珠(cat# CUB02) +未處理的裂解液；
Lane 5: CUB02 + CN04處理的裂解液.
*注：用細菌毒素CNF1(cat#CN04)處理細胞會(huì )導致Rac1的組成性激活，并隨后導致單泛素化和多泛素化。
可以看到，未經(jīng)修飾的Rac1與泛素親和珠和泛素對照珠（lane 2-5）發(fā)生非特異性相互作用；然而，單泛素化和多泛素化Rac1僅與泛素親和珠（lane 3）結合，而與泛素對照珠（lane 5）不結合。所以建議用戶(hù)在實(shí)驗時(shí)使用適當的對照珠來(lái)幫助區分未修飾的目標蛋白帶。
為了幫助大家更好的抓住PTM并且研究它們，現在Cytoskeleton公司對以下PTM研究相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行促銷(xiāo)：
即日起至2019.6.30，
購買(mǎi)以下任意產(chǎn)品均可享受7折優(yōu)惠，
不要錯過(guò)哦~
此次促銷(xiāo)產(chǎn)品清單如下
Signal-Seeker?試劑盒
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BK160 |
Signal-Seeker? Phosphotyrosine Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK160-S |
Signal-Seeker? Phosphotyrosine Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK161 |
Signal-Seeker? Ubiquitin Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK161-S |
Signal-Seeker? Ubiquitin Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK162 |
Signal-Seeker? SUMOylation Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK162-S |
Signal-Seeker? SUMOylation Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK163 |
Signal-Seeker? Acetyl-Lysine Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK163-S |
Signal-Seeker? Acetyl-Lysine Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK165 |
Signal-Seeker? SUMOylation-1 Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK165-S |
Signal-Seeker? SUMOylation-1 Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
乙?；贵w
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AAC01 |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (3C6.08.20) |
2 x 100 μl |
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AAC01-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (3C6.08.20) |
1 x 25 μl |
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AAC02 |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (7B5A1) |
2 x 100 μl |
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AAC02-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (7B5A1) |
1 x 25 ul |
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AAC03 |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (19C4B2.1) |
2 x 100 μl |
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AAC03-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (19C4B2.1) |
1 x 25 ul |
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AAC03-HRP |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody HRP Conjugates |
1 x 100 μl |
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AAC03-HRP-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody HRP Conjugates |
1 x 25 ul |
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AAC04-beads |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody Agarose Conjugates |
4 x 500 μl |
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AACX1 |
Chemically Acetylated Bovine Serum Albumin (BSA) |
1 x 500 μg |
磷酸化抗體
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APY03 |
Anti-Phosphotyrosine Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 100 μl |
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APY03-Beads |
Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads |
4 x 300 μl |
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APY03-HRP |
Anti-Phosphotyrosine-HRP Mouse Monoclonal Antibody |
1 x 100 μl |
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APY03-HRP-S |
Anti-Phosphotyrosine-HRP Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
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APY03-HRP-XL |
Anti-Phosphotyrosine-HRP Mouse Monoclonal Antibody |
Large Quantities |
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APY03-S |
Anti-Phosphotyrosine Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
SUMO化抗體
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ASM01 |
Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody |
1 x 100 μl |
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ASM01-S |
Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
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ASM11-Beads |
SUMOylation-1 Affinity Beads |
3 x 400 μl |
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ASM23 |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 100 μl |
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ASM23-HRP-S |
Anti-SUMO-2/3-HRP labeled Mouse Monoclonal Antibody (Clone 12F3) |
1 x 25 μl |
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ASM23-HRP |
Anti-SUMO-2/3-HRP labeled Mouse Monoclonal Antibody (Clone 12F3) |
1 x 100 μl |
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ASM23-S |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
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ASM24 |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 200 μl |
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ASM24-Beads |
SUMO-2/3 Affinity Beads |
2 x 400 μl |
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ASM24-S |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 150 μl |
泛素化抗體
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AUB01 |
Anti-Ubiquitin Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 100 μl |
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AUB01-HRP |
Anti-Ubiquitin-HRP Antibody |
1 x 100 μl |
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AUB01-HRP-S |
Anti-Ubiquitin-HRP Antibody |
1 x 25 μl |
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AUB01-S |
Anti-Ubiquitin Mouse Monoclonal Antibody (Trial size) |
1 x 25 μl |
|
AUB01-XL |
Anti-Ubiquitin Mouse Monoclonal Antibody |
4 x 500 μl |
其他相關(guān)試劑
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BLR01 |
BlastR Rapid Lysate Prep Kit |
50 purifications |
|
BLR02 |
BlastR Rapid Filtration Kit |
50 purifications |
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CIG01-beads |
Control for Immunoprecipitation IgG beads |
10 assays |
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CIG02-beads |
Control for Acetylation Immunoprecipitation IgG beads |
10 assays |
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CIG03-beads |
Control for SUM01 Immunoprecipitation IgG beads |
10 assays |
|
CUB02-beads |
Control for Ubiquitin Affinity Beads |
10 assays |
|
UBA01-beads |
Ubiquitin Affinity Beads |
40 rxs |
全國免費熱線(xiàn)：400 819 7199 （工作日：8:30 - 17:30） Email：bj_info@dakewe.net
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