ELISPOT試劑盒選擇三大要素，達優(yōu)為您指路！

隨著(zhù)酶聯(lián)免疫分析技術(shù)在醫學(xué)及生物學(xué)領(lǐng)域的廣泛應用，體外檢測各種細胞因子及抗體研究有了新的突破。面對不同的實(shí)驗我們怎樣才能得到更好的實(shí)驗數據？今天我們就和大家說(shuō)說(shuō)ELISPOT基本知識及試劑盒選擇的幾個(gè)要素。

酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測（ELISPOT）是將細胞培養技術(shù)和ELISA技術(shù)相結合，可以原位地檢測培養細胞體外分泌蛋白的高靈敏分析技術(shù)。該技術(shù)集高靈敏度、高可信度、高通量、單細胞水平、功能性檢測與低成本等諸多優(yōu)點(diǎn)于一身。根據研究目的及檢測蛋白類(lèi)型，可分為T(mén)細胞ELISPOT和B細胞ELISPOT兩種類(lèi)型。其中T細胞ELISPOT主要用于檢測刺激后細胞所分泌的痕量細胞因子，而B(niǎo)細胞ELISPOT主要用于檢測抗體分泌B細胞的頻率。ELISPOT是用抗體或抗原捕獲培養細胞分泌的蛋白，并以酶聯(lián)斑點(diǎn)顯色的方法將其表現出來(lái)。

本文結合達優(yōu)^?預包被ELISPOT試劑盒，將T細胞ELISPOT檢測細胞因子的基本原理說(shuō)明如下：

• 特異性單抗包被在培養孔底部，通過(guò)非特異性蛋白溶液封閉多余空白位點(diǎn)；
  

• 加入單個(gè)細胞懸液及刺激物培養，陽(yáng)性細胞經(jīng)活化分泌細胞因子，細胞因子就近被特異性包被抗體捕獲；

• 移出細胞，板底留下細胞因子的“影像”；

• 加入酶標記的檢測抗體，檢測抗體和 “影像”上的細胞因子結合，形成“抗體-抗原-抗體”夾心結構；

• 加入顯色底物，在酶的催化分解下，生成不可溶的色素，沉淀在膜上，即形成斑點(diǎn)；斑點(diǎn)計數，結果分析。

ELISPOT試劑選擇三大要素

• 抗體對的特異性及親和性

ELISPOT檢測技術(shù)是通過(guò)兩種高親和力、高特異性的抗細胞因子單克隆抗體來(lái)檢測淋巴細胞分泌細胞因子情況的一種方法，對抗體對質(zhì)量和純度有著(zhù)特殊的要求，因此勢必要選擇專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)ELISPOT抗體對的公司。達優(yōu)^?系列預包被ELISPOT試劑盒根據不同檢測因子，從其中挑選最佳組合抗體對進(jìn)行生產(chǎn)。

不同來(lái)源抗體對檢測效果對比圖

• 高效封閉系統的選擇

不同的檢測樣本在板孔培養過(guò)程中，受各種實(shí)驗條件影響，如果封閉不當都可能產(chǎn)生非特異性顯色，導致非特異性斑點(diǎn)的產(chǎn)生或者背景顏色的加重。這將直接影響到最后結果的判斷分析。達優(yōu)^?系列產(chǎn)品通過(guò)大量實(shí)驗，對不同來(lái)源、不同配方封閉方法進(jìn)行封閉效果的對比試驗，篩選出更高效的封閉系統，并將之運用到系列試劑盒產(chǎn)品中。

不同來(lái)源、配方封閉方案篩選對比圖    

• 酶聯(lián)信號放大系統的選擇

為實(shí)現ELISPOT檢測的高靈敏度，所用的信號放大系統——酶，要求純度高，催化反應轉化率高、專(zhuān)一性強、性質(zhì)穩定，制成的酶標抗體也必須是性質(zhì)穩定，且繼續保留活性部分和高效催化能力。對國際上不同公司開(kāi)發(fā)的最新通用性高效酶標抗體進(jìn)行對比性篩選試驗，一直作為達優(yōu)^?系 列產(chǎn)品質(zhì)控及品質(zhì)升級的一項重要工作持續進(jìn)行，其首要目的就是保持試劑盒采用最佳的酶聯(lián)信號放大系統，達到最佳檢測效果。

不同來(lái)源酶聯(lián)信號放大系統篩選效果對比圖

看到了這里，想必大家對ELISPOT試劑盒選擇有了一個(gè)初步的了解，是不是在默默的想小達君你不厚道呀，說(shuō)了這么久，也不來(lái)點(diǎn)ELISPOT試劑盒看看·······

各位客官別急，小達君這就為你們奉上~~

達優(yōu)^? ELISPOT產(chǎn)品列表

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達優(yōu)^? ELISPOT讀板服務(wù)

達優(yōu)^? ELISPOT檢測服務(wù)

其它說(shuō)明

• ELISPOT的檢測服務(wù)為實(shí)驗上門(mén)服務(wù)，需要到客戶(hù)實(shí)驗室進(jìn)行實(shí)驗，差旅費及食宿另行報價(jià)；

• 上述實(shí)驗操作所需試劑及耗材由實(shí)驗室自行準備齊全，不在該服務(wù)報價(jià)中；

• 檢測方案及相關(guān)問(wèn)題請具體咨詢(xún)；

• 報價(jià)具體費用明細最終詳見(jiàn)服務(wù)合同。