ELISA檢測樣本的處理

在收集標本前需有一個(gè)完整的計劃，需要清楚要檢測的成份是否足夠穩定。ELISA檢測提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進(jìn)行檢測的標本，及時(shí)儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，請取材后，將標本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗質(zhì)量，所以避免反復凍融。

◇ 液體類(lèi)標本：

包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

◇ 血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

◇ 血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

◇ 尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

◇ 細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

◇ 組織標本：

切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。