基因編輯其實(shí)不難 ——來(lái)自U Michigan和Cornell華人學(xué)者的新研究

很多小伙伴應該躍躍欲試，想用這個(gè)結合CRISPR/Cas9 RNP和同源重組的方法來(lái)高效進(jìn)行基因編輯吧？但是根據新聞介紹，作者花了一年多時(shí)間，進(jìn)行了1000多個(gè)電轉樣品的測試才掌握了電轉的合適條件。這又讓人感覺(jué)這個(gè)方法難度不小，即使在論文指引下，想要在自己實(shí)驗室消化吸收怎么也得花不少力氣吧？

昨天另一篇來(lái)自密歇根大學(xué)和康奈爾大學(xué)的論文展示了一種新的電轉方法，該方法結合同源重組可以大大提高基因編輯的效率。

文章的共同通訊作者為密西根大學(xué)的徐捷教授和康奈爾大學(xué)的夏曉峰教授。這篇文章和Marson組文章的共同點(diǎn)是都使用電轉Cas9RNP的方法在一些之前認為很難編輯的細胞上取得了很高的同源重組效率。Marson實(shí)驗室的研究更加深入，在免疫治療上幾個(gè)重要的基因位點(diǎn)做了基因編輯的研究，不僅對于CAR-T可能有很大幫助，對于TCR-T的制備可能也有重要意義。

徐、夏兩個(gè)實(shí)驗室主要從事干細胞和轉基因動(dòng)物模型研究，因此對于基因編輯主要著(zhù)眼在方法學(xué)上，力爭使基因編輯高效并且簡(jiǎn)單，可以普遍性地應用于各種細胞上。相比于Marson組的文章，徐、夏這篇文章還報道了在除了T細胞之外的多種細胞包括iPSC干細胞，MSC間充質(zhì)干細胞，以及一些細胞系上取得的良好效果。

對比文章可以看到，Marson實(shí)驗室的電轉條件摸索花了很多時(shí)間，他們用的電轉系統是Amaxa Nucleofector。這篇Scientific Reports的文章則使用的是一種新的電轉系統——Celetrix電轉系統，在和Nucleofector的直接對比試驗中表現出更好的性能，包括細胞成活率和轉染效率。值得一提的是，Celetrix電轉系統由華人科學(xué)家陳劍發(fā)明，他也是該文的作者之一。

看過(guò)這兩篇文章，小伙伴們是不是也感覺(jué)使用高效的電轉系統，在多種細胞包括和免疫治療直接相關(guān)的T細胞中的基因編輯并不是一件困難的事情了呢？小伙伴們，大膽地去做自己的設計吧！

Celetrix電轉系統被稱(chēng)之為第三代電轉技術(shù)，采用獨特的加壓電擊管替代傳統U型電擊杯的設計，奠定了它具有更高電轉效率和更高細胞存活率的基礎原理的優(yōu)越性，另外為輕松實(shí)現大容量細胞電轉成為現實(shí)。

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