Part3——Denovo FCS Express6 試用版使用指南-入門(mén)篇（中）

1. 手動(dòng)脫機調補償及自動(dòng)調補償

A. 手動(dòng)調補償（一般在僅有樣本管或者自動(dòng)調補償后微調時(shí)使用）

打開(kāi)軟件，插入一個(gè)數據（示例中為彩點(diǎn)圖），當插入一個(gè)圖形后，如需更換數據的顯示方式，如想將彩點(diǎn)圖更換為其它圖形（如密度圖等），可選中該圖形，直接按照下述步驟更改。

圈中目的細胞群，拖至空白處形成一個(gè)新的圖形，并根據需要改動(dòng)橫縱坐標軸的參數。本示例中以FITC和PE為例，調節此兩通道之間的補償。下圖所示，補償未經(jīng)過(guò)調節，FITC與PE之間有補償。

此時(shí)可以手動(dòng)調節兩通道之間的補償，該數據為FITC單管，可用PE-FITC調節FITC滲漏到PE通道去的熒光。步驟如下圖所示：

出現補償編輯欄，從PE通道中去除FITC的熒光信號，使PE通道的Mean/Median值與陰性細胞群一致。

點(diǎn)擊OK，則FITC滲漏到PE通道的熒光被扣除。

B. 自動(dòng)調補償（需要陰性管及各單陽(yáng)管）

    打開(kāi)軟件，按照下述步驟操作。

建立直方圖后，在原本的版面Page 1后面出現Scatter Plot及其它各個(gè)單管的Control界面。

接著(zhù)，在Scatter Plot版面中，將門(mén)的位置移至正確的細胞群所在的位置，如下圖所示。

如所示的方形門(mén)不能正確的圈出細胞群，可按以下步驟將該門(mén)改變?yōu)樽杂尚伍T(mén)等。

圈好門(mén)之后，選中單管Control版面，按照陰性細胞與陽(yáng)性細胞的位置調整Marker門(mén)的位置。

依次調整好各單管Control的Marker門(mén)的位置。此處不一一列舉?；氐窖a償界面。此處的3、4適用于使用補償beads調節補償的情況（由于本次數據為細胞，此處不詳細列出，如對此步驟感興趣，可咨詢(xún)小達君）

則自動(dòng)調補償就完成了。補償矩陣及溢出矩陣就出現在補償欄中。

此時(shí)，可點(diǎn)擊保存將此補償下來(lái)，以便下次使用?；氐絇age 1，當添加一個(gè)未經(jīng)過(guò)補償調節的數據時(shí)，將該補償拖過(guò)去，則該補償矩陣就被應用到數據中。

或者通過(guò)右鍵-Format-Overlay-Compension將補償應用到該數據中。如下圖所示：

2. 實(shí)驗數據的統計

選擇右鍵-Statistics，可添加門(mén)數據及十字門(mén)象限數據。

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